martes, 10 de noviembre de 2009

InMuNoFlUoReScEnCiA


La inmunofluorescencia (IF) es una técnica que emplea anticuerpos conjugados a fluorocromos. Losfluorocromos son moléculas que al ser excitadas con la energía de una determinada longitud de onda son capaces de emitir energía de una longitud de onda mayor.

Se aplica en diagnóstico de patologías cutáneas y renales e investigación.

inmunoflorescencia directa:

La IF directa permite la detección de antígenos en un paso. Utiliza anticuerpos conjugados a isotiocianato de fluoresceína. La lectura se realiza en un microscopio de fluorescencia, que emite luz ultravioleta de una determinada longitud de onda.

Inmunofluorescencia indirecta:

La IF indirecta permite la detección de anticuerpos circulantes.

Ventaja Y Desventaja

Las ventajas de la IF son que es una técnica rápida, reproducible, permite tinciones dobles e incluso se aplica en microscopia confocal. Las desventajas son su baja sensibilidad, que las reacciones no son permanentes y que es necesario fotografiar las reacciones positivas para documentar los casos. Además, requiere microscopio de fluorescencia, que es un instrumento de relativo alto costo.

martes, 3 de noviembre de 2009

Citometria de flujo

Las células en suspensión a los que se les han añadido los diferentes AcM (anti IgA e IgG) pasan a través de un tubo muy fino en una sóla fila de células, y son leídas por el láser y el haz de luz; el primero identifica los anticuerpos marcados y el segundo, el tamaño de las células.
La CMF es una técnica sencilla que se aplica en la rutina diaria de muchos laboratorios clínicos y de investigación, capaz de proporcionar resultados de forma rápida que pueden ser aplicables al diagnostico. Gracias a su gran especificidad es capaz de distinguir entre varias diferentes, y detectar una población celular en una muestra en la que predominan otras poblaciones celulares mayoritarias. Pero la principal característica de la CMF es que puede ofrecer información simultánea de varios parámetros de cada una de las células analizadas y la relación entre los parámetros de una célula y los de otra célula también analizada. Permite el análisis de dos parámetros de dispersión, SSC/FSC y tres de fluorescencia (en equipos con un solo láser), Fl1, Fl2 y Fl3, y de una cuarta fluorescencia en equipos con dos láseres. (www.citometriadeflujo.com